期刊简介
本报创刊于1953年,是代表我国解剖学科发展水平的高级综合性学术期刊。主要刊登人类学、大体解剖学、比较解剖学、神经解剖学、组织学、胚胎学、细胞学、分子细胞学各学科的创见性研究论著。并辟有“短篇报道”、“综述”、“研究通讯”、“新技术方法”、“书讯”、“书评”等栏目。
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- 杂志名称:解剖学报杂志
- 主管单位:中国科学技术协会
- 主办单位:中国解剖学会
- 国际刊号:0529-1356
- 国内刊号:11-2228/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:1992年中国科协优秀学术期刊三等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 医学文摘, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中)
RNA干扰介导的端锚聚合酶1表达下调诱导人神经母细胞瘤细胞的凋亡
田晓红;柏树令;范军;侯伟健;佟浩;徐赫
关键词:RNA干扰, 端锚聚合酶1, 神经母细胞瘤, Wnt/β-catenin信号通路, 免疫印迹法, 人
摘要:目的 探讨RNA干扰(RNAi)介导的端锚聚合酶1(TNKS1)的表达下调对入神经母细胞瘤(NB)细胞SH-SY5Y体外增殖能力和凋亡的影响及机制,为开发治疗NB的新靶点提供一定的实验基础.方法 根据TNKS1基因序列,设计合成3个TNKS1基因的特异性短发夹环(shRNA)干扰片段,利用慢病毒作为载体,构建目的基因的RNAi序列.慢病毒感染SH-SY5Y细胞,实时定量PCR(Real-time PCR)法检测TNKS1基因的表达,筛选出佳干扰序列进行后续实验.然后进行克隆形成实验,检测RNAi-TNKS1后细胞增殖能力的改变.并进一步用Western blotting法检测抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Caspase-3、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路的关键蛋白β-catenin及其下游靶蛋白Cyclin D1和c-Myc的表达,后用透射电镜观察凋亡形态的改变,探讨RNAi-TNKS1对细胞凋亡的影响及其作用机制.结果 慢病毒载体构建成功,病毒滴度为5×1011TU/L.Real-time PCR检测结果显示,#3shRNA为佳的有效靶点.克隆形成实验的结果显示,RNAi-TNKS1后SH-SY5Y细胞的克隆形成率较对照组明显下降.Western blotting结果显示,RNAi-TNKS1可显著抑制Bcl-2蛋白的表达,促进Caspase-3蛋白的表达.此外,Wnt/β-catenin通路的关键蛋白β-catenin及其下游靶蛋白Cyclin D1和c-Myc的表达也降低.透射电镜结果显示,RNAi-TNKS1后细胞呈现明显的凋亡结构和形态.结论 RNAi介导的TNKS1的表达下调可降低SH-SY5Y细胞的体外增殖能力,诱导其凋亡,可能部分是通过抑制Wnt/β-catenin通路发挥作用.
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